gb OneStep RT-qPCR Kit to zestaw firmy Generi Biotech przeznaczony do wykonywania odwrotnej transkrypcji (RT) i reakcji real-time PCR (qPCR) w jednym etapie, w jednej mieszaninie reakcyjnej. Produkt umożliwia analizę RNA bez konieczności wcześniejszego, oddzielnego przepisywania RNA na cDNA.
Jednoetapowy workflow RT-qPCR pozwala uprościć procedurę laboratoryjną, ograniczyć liczbę etapów manualnych i zmniejszyć ryzyko kontaminacji. Wystarczy dodać etap termiczny odwrotnej transkrypcji przed etapem amplifikacji PCR w programie cyklera real-time PCR.
gb OneStep RT-qPCR Kit może być wykorzystywany do analiz, w których materiałem wyjściowym jest RNA, a dalsza detekcja prowadzona jest metodą real-time PCR.
Zestaw znajduje zastosowanie w:
- Jednoetapowej analizie RT-qPCR
- Odwrotnej transkrypcji RNA do cDNA
- Amplifikacji cDNA w tej samej reakcji
- Analizach ekspresji genów
- Detekcji sekwencji RNA przy użyciu cyklera real-time PCR
Produkt nie wymaga dodatkowego oprzyrządowania poza standardowym cyklerem real-time PCR. Analiza może być wykonana bezpośrednio na urządzeniu qPCR poprzez dodanie etapu odwrotnej transkrypcji przed amplifikacją.
Zestaw składa się z dwóch komponentów:
- OneStep Buffer
- OneStep Enzyme
Po zmieszaniu komponentów powstaje kompletna mieszanina OneStep Master Mix. Zestaw zawiera hot-start Taq DNA polymerase, bufor reakcyjny, dNTP, MgCl₂ oraz odwrotną transkryptazę M-MuLV.
gb OneStep RT-qPCR Kit nie zawiera pasywnego barwnika referencyjnego. Jeśli dany typ aparatu wymaga normalizacji z użyciem pasywnego barwnika referencyjnego, można dodać go do mieszaniny reakcyjnej oddzielnie.
Zestaw jest 2× stężony i przeznaczony do 50 reakcji RT-qPCR o objętości 20 µl. Odwrotna transkrypcja oraz amplifikacja PCR są prowadzone w jednej probówce, co upraszcza workflow i ogranicza konieczność przenoszenia materiału między etapami.
| Cecha | Specyfikacja |
|---|
| Typ produktu | Zestaw do jednoetapowej RT-qPCR |
| Zastosowanie | Odwrotna transkrypcja RNA i real-time PCR w jednej reakcji |
| Format produktu | 2 komponenty: OneStep Buffer i OneStep Enzyme |
| Stężenie mieszaniny | 2× |
| Liczba reakcji | 50 reakcji |
| Objętość reakcji | 20 µl |
| Enzymy | Hot-start Taq DNA polymerase, M-MuLV reverse transcriptase |
| Składniki reakcji | Bufor, dNTP, MgCl₂, enzymy |
| Pasywny barwnik referencyjny | Nie zawiera; możliwość dodania oddzielnie |
| Status produktu | Life Sciences / RUO |
Zestaw umożliwia połączenie odwrotnej transkrypcji oraz amplifikacji real-time PCR w jednym przebiegu, bez oddzielnego przygotowywania cDNA.
Jednoetapowa procedura ogranicza liczbę manipulacji próbką, skraca czas przygotowania reakcji i zmniejsza ryzyko kontaminacji.
Analiza może być wykonana na dowolnym cyklerze real-time PCR, jeśli program reakcji obejmuje etap odwrotnej transkrypcji przed amplifikacją PCR.
Zestaw składa się z OneStep Buffer i OneStep Enzyme, których zmieszanie tworzy kompletny Master Mix do reakcji RT-qPCR.
Produkt nie zawiera pasywnego barwnika referencyjnego, co pozwala dodać go oddzielnie tylko wtedy, gdy wymaga tego konkretna platforma qPCR.
